PCR विश्लेषण: यो के हो? को PCR विश्लेषण कसरी लिन

यो त लामो पहिले मानिसहरूलाई विभिन्न संक्रामक रोगहरु को निदान को लागि एक, विश्वसनीय अत्यधिक संवेदनशील र तीव्र विधि विकास गरे। यस्तो विधि "PCR विश्लेषण" भनिन्छ। के छ, के छ त्यो सूक्ष्मजीवहरु पहिचान गर्न सक्छन् के र कसरी लिन, हामी यस लेखमा वर्णन हुनेछ, यसको सार।

आविष्कारको इतिहास

एक अमेरिकी वैज्ञानिक Keri Myullis 1983. मा सुरुमा पेटेंट को polymerase श्रृंखला प्रतिक्रिया (PCR) आविष्कार छ निदान को विधि उहाँले काम जो "Cetus निगम," द्वारा र यसको निर्माता। तर 1992 मा सबै अधिकार र पेटेंट कम्पनी बेचिएको थियो "Hoffman-ला रशे।" कि पछि, यो यस्तै अध्ययन समानान्तर मा बाहिर थिए र थिए यस्तो Elis चेन दाऊदले एडगर, यूहन्ना rre अन्य अमेरिकी जीवशास्त्रीहरूको, द्वारा रिपोर्ट कि बाहिर गरियो। 1980 मा उहाँले यो मुद्दा र सोभियत वैज्ञानिकहरू ए Slyusarenko ए Kaledin र संलग्न एस Gorodetsky। तसर्थ, एकमात्र प्रतिलिपि अधिकार मालिक सम्भव छैन निर्धारण गर्न। धेरै उल्लेखनीय biochemists polymerase प्रतिक्रिया को विधिहरू विकास गर्न योगदान र CERN आफ्नो नवाचारै पेटेंट। PCR यस बिन्दु विश्लेषण मा विशेष सुसज्जित प्रयोगशालाहरुमा भर बाहिर छ।

सारांश PCR निदान

PCR विश्लेषण: यो के हो र यसले कसरी काम गर्छ? विधि को सार कृत्रिम मा एक विशेष इन्जाइम डीएनए polymerase प्रयोग गरेर मात्रा विशिष्ट माइक्रोबियल वातावरणमा वृद्धि गर्न भन्ने तथ्यलाई मा निहित। यो बारम्बार गुणन उपलब्ध डीएनए सामाग्री गर्न। त्यसैले, एक नमूना एक रोगजनक को उपस्थिति राशि जीव रसायन प्रयोगशाला हेरफेर को खर्च मा वृद्धि हुनेछ, र जीवाणुहरु को माइक्रोस्कोप मा पत्ता लगाउन गाह्रो छैन।

सामाग्री को अध्ययन कस्तो छ?

आवश्यक विश्लेषण पूरा गर्न:

• डीएनए टेम्पलेट;
• प्राइमरों सामाग्री को खण्ड को अन्त्य जडान;
• thermostable डीएनए polymerase इन्जाइम;
• रसायन, इन्जाइमहरु को समुचित संचालन सुनिश्चित;
• डीएनए सामाग्री को विकास र विकासका लागि उपयुक्त अवस्था सिर्जना लागि बफर समाधान आवश्यक छ।

denaturation, एनिलिंग र बढाव: PCR तीन कदम को निर्वाचकगण 25-30 दोहोरिन्छ सञ्चालन गर्न।

एक विशेष उपकरण प्रयोग गरेर polimezarnoy श्रृंखला प्रतिक्रिया विश्लेषण गर्न - cycler। आधुनिक उपकरण तपाईं निदान समयमा त्रुटिहरू हटाउन आवश्यक ताप र ठंडा ट्यूब कार्यक्रम स्थापना गर्न अनुमति दिन्छ।

को निदान कहाँ लागू गर्ने?

Polimezarnoy श्रृंखला प्रतिक्रिया विधि चिकित्सा विभिन्न क्षेत्रहरू प्रयोग गरिन्छ:

• अदालती प्रयोग यस्तो बाल, र्याल वा रगत को रूप मा, आनुवंशिक सामाग्री पहिचान गर्न;
• रगतको PCR विश्लेषण जस्तै एक विशिष्ट दबाइ व्यक्तिगत आनुवंशिक लगाए प्रतिक्रिया को खोज को लागि, genotyping गर्न मद्दत गर्छ;
• मान्छे बीचको विधि सेट परिवार सम्बन्धहरु द्वारा;
• सबैभन्दा खोजे-PCR विधि विभिन्न संक्रामक रोगहरु को सङ्कल्प लागि चिकित्सा निदान मा भएको छ।

PCR के संक्रमण प्रकट?

तसर्थ, चिकित्सा लामो सफलतापूर्वक PCR विश्लेषण प्रयोग गरिएको छ। यसलाई के हामी पहिले नै सिकेका छन्। र केही रोगजनकों यो पत्ता लाग्यो सकिन्छ? PCR निम्न निदान संक्रमण :

• hepatitis ए, बी, सी;
• ureaplasmosis;
• candidiasis;
• chlamydia;
• mycoplasmosis;
• जीवाणु vaginosis;
• संक्रामक mononucleosis;
• trichomoniasis;
• एचपीवी संक्रमण;
• क्षयरोग;
• यस 1st र 2nd प्रकार को herpes संक्रमण;
• Helicobacter pylori संक्रमण;
• cytomegalovirus;
• भ्यागुते रोग;
• salmonellosis;
• एचआईभी संक्रमण।

साथै, PCR विधिहरू क्यान्सर को निदान मा प्रयोग गरिन्छ।

विधि को लाभ

निदान PCR धेरै लाभ छ:

1. उच्च संवेदनशीलता। पनि मात्र केही डीएनए अणु microorganism संग PCR विश्लेषण संक्रमण उपस्थिति निर्धारण गर्छ। यो पुरानो र latent रोगहरु निरन्तर लागि विधि मद्दत गर्छ। अक्सर यस्तो अवस्थामा मा, microorganism अन्य तरिकामा uncultivated छ।
2. यस्तो र्याल, रगत, यौन चयन, बाल, उपकला कक्षहरू रूपमा, कुनै पनि उपयुक्त सामाग्री छानबिन गर्न। सबै भन्दा साधारण एक रक्त परीक्षण र urogenital swab PCR छ।

3. एक विस्तार बढ्दै संस्कृतिका आवश्यक छैन। निदान को स्वचालित प्रक्रिया 4-5 घण्टा पछि अध्ययन को परिणाम प्राप्त गर्न अनुमति दिन्छ।
4. विधि लगभग पूर्ण प्रामाणिक छ। झूटा-नकारात्मक परिणाम मात्र छुट्टयाएर अवस्थामा रेकर्ड भयो।
5. एक नमूना सामाग्री मा रोगजनकों को धेरै प्रकार पहिचान गर्न सक्ने क्षमता। यो मात्र होइन रोग को निदान को प्रक्रिया गति, तर पनि एकदम लागत सामाग्री कम गर्छ। अक्सर, डाक्टर को PCR को एक व्यापक विश्लेषण prescribes। मूल्य सर्वेक्षण, को छ रोगजनकों निर्धारण मिलेर बारेमा 1,500 rubles छ।

विश्लेषणका लागि तयारी सिफारिसहरू

परिणामहरू PCR अध्ययन गर्ने निदान लागि प्रारम्भिक तयारी को सिफारिसहरू निम्न, परीक्षण गर्न आवश्यक मान्य हुन:

1. लार को वितरण गर्नु अघि सामाग्री नमूना पहिला 4 घण्टा खाने र दबाइ नगर्न गर्नुपर्छ। तुरुन्त प्रक्रिया अघि, उसिनेर पानी संग आफ्नो मुख कुल्ला।
2. गालामा को भित्र बाट नमूना लिदा माथिको नियम निर्देशित हुनुपर्छ र। rinsing पछि prostatic स्राव जारी गर्न छाला बाहिर उज्यालो मालिश पूरा गर्न सिफारिस गरिएको छ।
3. मूत्र सामान्यतया घरमा संकलित छ। यसो गर्न, तपाईं जनन एक गहन शौचालय सञ्चालन गर्न आवश्यक छ। एक बाँझ प्लास्टिक कन्टेनर मा मूत्र को 50-60 एमएल सङ्कलन गर्न आवश्यक छ। महिला योनी मा tampon सम्मिलित लागि, र सकेसम्म धेरै मानिसहरू छाला सामाग्री को शुद्धता सुनिश्चित गर्न गुना पुल यसलाई सिफारिस गरिएको। तपाईं menses बेला सामाग्री लिन सक्दैन।
4. शुक्राणु को वितरण लागि पूर्व सामाग्री को संग्रह गर्न 3 दिन को समयमा यौन सहवास छुँदै नछुने गर्न। साथै, डाक्टर सना र तातो स्नान, रक्सी र मसालेदार खानेकुरा प्रयोग नत्याग्ने सल्लाह छन्। 3 घण्टा विश्लेषण गर्न पूर्व वी डी नगर्न गर्न आवश्यक छ।
5. को urogenital धब्बा एक chlamydia PCR मा विश्लेषण, महिला र पुरुष दुवै 3 दिनको लागि भनेर यौन बाँकी सिफारिस गरिएको छ भने, उदाहरणका लागि, पारित गर्न। विश्लेषण अघि 2 हप्ता एन्टिबायोटिक लिन सक्दैन। एक हप्ताको लागि तपाईं घनिष्ठ gels, मलहम, योनी suppositories, douching प्रयोग गर्न बन्द गर्न आवश्यक छ। अध्ययन गर्न पूर्व 3 घण्टा वी डी नगर्न गर्नुपर्छ। महिनावारी बार सामाग्री बाहिर छैन समयमा मात्र 3 दिन spotting को समापन पछि urogenital धब्बा लाग्न सक्छ।

गर्भावस्था को समयमा PCR

एक बच्चा लागि प्रतीक्षा अवधि, धेरै संक्रामक रोगहरु, यौनजन्य रोगहरू, सामान्य भ्रूण विकास लागि अत्यन्तै खतरनाक हो। STDs intrauterine विकास, गर्भपात वा पहिले जन्म, बच्चा को जन्मजात malformations ट्रिगर गर्न सक्नुहुन्छ। त्यसैले, यो स्क्रीनिंग PCR प्रारम्भिक गर्भावस्था मा प्राप्त गर्न महत्त्वपूर्ण छ। पार दर्ता गर्दा विश्लेषण आवश्यक छ - 12 हप्ता सम्म।

बार सामाग्री विशेष ब्रश संग ग्रीवा नहर आउँछ। प्रक्रिया पीडारहित छ र बच्चालाई कुनै खतरा poses। सामान्यतया Chlamydia PCR विधि, साथै ureaplasmosis, mycoplasmosis, cytomegalovirus, herpes, papillomavirus लागि विश्लेषण गर्भावस्था को समयमा। PCR 6 भनिन्छ यस्तो परीक्षा जटिल।

एचआईभी को निदान लागि PCR

कारण polymerase श्रृंखला प्रतिक्रिया को विधि शरीर मा परिवर्तन र निदान को अवस्था धेरै संवेदनशील छ भन्ने तथ्यलाई गर्न, धेरै कारक नतिजा असर गर्न सक्छ। 96-98% - एचआईभी संक्रमण लागि त्यसैले PCR विश्लेषण एक विश्वसनीय विधि, यसको दक्षता छैन। परीक्षण को बाँकी 2-4% गलत सकारात्मक परिणाम दिन्छ।

तर एचआईभी को PCR निदान बिना केही परिस्थितिमा गर्न सक्नुहुन्न। सामान्यतया, यो गलत-नकारात्मक ELISA संग मानिसहरूलाई लगे छ। यी तथ्याङ्कले व्यक्ति अझै भाइरस एंटीबडी विकसित गरेको छ कि छैन र धेरै संख्या वृद्धि नगरी पत्ता सकिन्छ संकेत गर्छ। यो एक रक्त परीक्षण PCR विधि सञ्चालन गरेर हासिल गर्न सकिन्छ।

पनि एचआईभी-सकारात्मक आमा जन्मिएको बच्चाहरु को एक निदान जीवनको पहिलो वर्ष, आवश्यक छ। विधि मजबूती बच्चा को स्थिति निर्धारण गर्न मात्र तरिका हो।

hepatitis को निदान लागि PCR

Polymerase श्रृंखला प्रतिक्रिया विधि साथै संक्रमण वा लक्षण शुरू भएको एंटीबडी को गठन अघि hepatitis ए, बी, सी, को भाइरस को डीएनए को पत्ता लगाउने अनुमति दिन्छ। विशेष प्रभावकारी देखि यस्तो रोग को 85% asymptomatic छन् र समसामयिक उपचार बिना पुरानो हुन्छ, hepatitis सी मा PCR विश्लेषण छ।

को रोगजनक को सामयिक पत्ता लगाउने जटिलताहरू र दीर्घकालीन उपचार जोगिन मदत गर्नेछ।

एकीकृत PCR स्क्रिनिङ

व्यापक PCR विश्लेषण: यो के हो? यो स्क्रिनिङ विधि polimezarnoy श्रृंखला प्रतिक्रिया साथ निर्धारण समावेश जो धेरै प्रजाति संक्रमण: म्यकोप्लास्मा genitalium, म्यकोप्लास्मा hominis, Gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, cytomegalovirus, ureaplasma urealitikum, herpes 1st र 2nd प्रकार, gonorrhea papillomavirus। यो निदान को मूल्य 2,000 3,500 rubles देखि दायरा। त्यसको आधारमा क्लिनिक, सामाग्री र उपकरण मा, साथै विश्लेषण को प्रकार मा: मात्रात्मक वा गुणात्मक। आफ्नो मामला मा के आवश्यक छ - डाक्टर निर्णय गर्छ। केही अवस्थामा, तपाईं बस जस्तै एचआईभी, मात्रात्मक titer द्वारा प्ले महत्वपूर्ण भूमिका रूपमा अरूलाई, मा रोगजनक को उपस्थिति पत्ता लगाउन। माथिको रोगजनकों परीक्षा को सबै को निदान मा "PCR 12 को विश्लेषण" को रूपमा उल्लेख।

विश्लेषण परिणाम गूढ रहस्य

ट्रान्सक्रिप्शन PCR विश्लेषण सरल छ। त्यहाँ मात्र 2 सूचकांक मात्रा हो - "। नकारात्मक" "सकारात्मक" र को रोगजनक को खोज मा 99% निर्धक्क डाक्टर रोग उपस्थिति पुष्टि र रोगी को उपचार सुरु गर्न -th गर्न सक्नुहुन्छ। पत्ता जीवाणुहरु को एक संवाददाता स्तम्भ सूचकांक नम्बर मा संक्रमण निर्धारण को मात्रात्मक विधि निर्दिष्ट गरिनेछ। मात्र एक डाक्टर रोग को हदसम्म निर्धारण र आवश्यक उपचार गर्ने सल्लाह दिन्छन् गर्न सक्नुहुन्छ।

केही अवस्थामा, उदाहरण, PCR द्वारा एचआईभी संक्रमण निर्धारण नकारात्मक परिणाम संग को लागि, त्यहाँ थप सर्वेक्षण यी तथ्याङ्कले पुष्टि गर्न को लागि एक आवश्यकता छ।

जहाँ परीक्षण गर्न?

सार्वजनिक क्लिनिक वा निजी प्रयोगशाला जहाँ पारित-PCR विश्लेषण? दुर्भाग्यवश, नगरपालिका चिकित्सा संस्थाहरू उपकरण र विधिहरू मा अक्सर पुराना छन्। त्यसैले आधुनिक उपकरण र उच्च योग्य कर्मियों संग निजी प्रयोगशालाओं प्राथमिकता दिन राम्रो छ। साथै, तपाईंले एक निजी क्लिनिक मा धेरै छिटो परिणाम प्राप्त गर्नुहोस्।

मास्को मा, धेरै निजी प्रयोगशालाओं विभिन्न संक्रमण लागि PCR विश्लेषण प्रस्ताव। उदाहरणका लागि, "Vita", "एकीकृत क्लिनिक," "सुखी परिवार जस्ता क्लीनिक मा", "uro-प्रो", बाहिर PCR विश्लेषण लगे। सर्वेक्षण मूल्य 200 rubles छ। एक रोगजनक निर्धारण लागि।

यो प्रायजसो PCR द्वारा संक्रामक रोगहरु को निदान संक्रमण को प्रारम्भिक चरणमा मा शरीर मा रोगजनक पत्ता छिटो र भरपर्दो तरिका हो भनेर अन्तमा गर्न सकिन्छ। यद्यपि, केही अवस्थामा, निदान को अन्य विधिहरू चयन गर्न। मात्र एक विशेषज्ञ हुन सक्छ एक अध्ययन यस्तो आवश्यकता निर्धारण। PCR विश्लेषण गुप्तिकरण उल्टाउन पनि एक पेशेवर दृष्टिकोण आवश्यक छ। आफ्नो चिकित्सकको सल्लाह पालन र आफ्नै परीक्षण, आवश्यक नभएका दिन छैन।